Coombsov test

Z Coombsov test deteguje protilátky proti erytrocytom v sére pacienta a používa sa napríklad štandardizovaným spôsobom v kontexte starostlivosti o materstvo a stanovovania krvných skupín. Skúšobný postup funguje s králičím sérom a existuje v priamej a nepriamej forme, ktoré sa používajú na rôzne otázky.

Čo je Coombsov test?

Na detekciu protilátok proti erytrocytom sa používa tzv. Coombsov test. Test deteguje protilátky triedy IgG. Tieto protilátky sa považujú za „nekompletné“ protilátky a nemôžu spôsobiť zlepenie krvných buniek. Avšak kvôli pentamérnej štruktúre môžu IgM protilátky indukovať takúto väzbu, a preto sa nazývajú "kompletné" protilátky.

V Coombsovom teste sa na detekciu protilátok používa tzv. Coombsov sérum, ktoré je známe aj ako antihumánny globulín. Sérum Coombs sa skladá z krvného séra králikov, ktorí boli imunizovaní proti ľudským protilátkam triedy IgG. Skúška sa vykonáva buď v skúmavke alebo ako súčasť aglutinácie mikrokolonov. Coombsov test sa vracia k Cambridgeovmu patológovi Coombsovi a používa sa hlavne v hematológii na diagnostikovanie hemolytickej anémie. Tieto anémie môžu ovplyvniť napríklad novorodencov s Rh nekompatibilitou.

V transfúznej medicíne sa test používa aj na testy sérologickej tolerancie. Pojem Coombsov test sa v podstate týka iba vyšetrovacej techniky a teda použitia anti-ľudského globulínu. Pri textovom postupe sa rozlišuje priama a nepriama forma.

Funkcia, účinok a ciele

Priamy Coombsov test detekuje IgG, ktorý sa drží na erytrocytoch. V rámci testu sa erytrocyty odoberajú z krvi pacienta a zbavia sa plazmy. Skúšajúci ich potom pridá do Coombsovho séra a takto ich inkubuje.

Ak krv nesie protilátky proti erytrocytom a tieto protilátky sú viazané na erytrocyty, sérum Coombs a jeho protilátky sa viažu na ľudský IgG testovanej vzorky. Po pridaní činidla zvyšujúceho reakciu dôjde k aglutinácii a test sa vyhodnotí ako pozitívny. Nepriamy test Coombs funguje trochu inak. Tento test pozostáva z dvoch krokov a zisťuje protilátky proti cudzím červeným krvinkám. Tieto protilátky vo vzorke krvi voľne cirkulujú a nie sú viazané na erytrocyty. Prvým krokom postupu nepriameho testu je inkubácia vzorky krvnej plazmy s testovanými erytrocytmi.

Ak sú v testovanom sére protilátky, viažu sa na erytrocyty, hoci nedochádza k adhézii. V druhom kroku sa Coombsove sérum zmieša s testovanými erytrocytmi a drží sa spolu. Napríklad pri pozitívnom nepriamom Coombsovom teste je možné preukázať nekompatibilitu makaka rhesus dokumentáciou nekompletných protilátok v krvi matky.

Priamy Coombsov test existuje iba vo variante opísanom vyššie, a preto je vždy zameraný na detekciu alebo vylúčenie zaťaženia protilátkami na erytrocytoch pacienta.

Nepriamy Coombsov test je spojený s rôznymi formami použitia, ktoré zvyčajne zodpovedajú testu protilátok alebo testu sérologickej tolerancie. Nepriamy test sa však môže použiť aj v kontexte ďalších vyšetrení a potom sa použije napríklad na stanovenie rôznych protilátkových špecifít. Skúšobná metóda nepriameho testu zostáva rovnaká, ale jej názov sa môže v jednotlivých prípadoch líšiť s otázkou skúšky. Z tohto dôvodu nie je možné od laboratória požadovať nepriamy Coombsov test, ale musí špecifikovať účel alebo cieľ testu.

Riziká, vedľajšie účinky a nebezpečenstvá

S Coombsovým testom je zvyčajne spojených len niekoľko rizík alebo vedľajších účinkov. Užívanie krvi môže byť pre pacienta nepríjemné. Možné je aj odumretie. Tieto časy však v priebehu niekoľkých dní ustúpia.

Niektorí ľudia sa cítia unavení, cítia sa zle alebo majú bolesti hlavy, keď majú krv natiahnutú. Spravidla tieto príznaky netrvajú dlhšie, ale skôr v ten istý deň. V každom prípade sa pacientovi na skúšku odoberie relatívne málo krvi, takže vedľajšie účinky sa vyskytujú iba vo veľmi zriedkavých prípadoch. Coombsov test nevyžaduje ústavnú starostlivosť, ale môže sa vykonať ambulantne. Čas, ktorý laboratórium trvá, závisí od typu testovacej metódy a účelu testu.

Test má osobitný klinický význam v prípade autoimunitnej hemolytickej anémie, pri ktorej vlastné protilátky tela imunitného systému spôsobujú hemolýzu erytrocytov, a teda vedú k anémii. Priamy Coombsov test je zvyčajne pozitívny na takéto choroby. Toto umožňuje lekárovi urobiť relatívne spoľahlivú diagnózu pacienta po pozitívnom teste. Situácia je iná, ak je test negatívny. Negatívny priamy Coombsov test nevyhnutne neznamená, že choroba je vylúčená. Existuje tiež Coombs-negatívny variant autoimunitnej hemolytickej anémie. V takom prípade musí pacient s negatívnym testom znášať ďalšie diagnostické postupy.

V prípade opísaného ochorenia patrí napríklad k negatívnym testom stanovenie autoprotilátok alebo diagnostika prostredia. V súvislosti s inými chorobami možno negatívny Coombsov test určite vylúčiť. Za určitých okolností môžu po určitých otázkach po pozitívnom Coombsovom teste nasledovať ďalšie preskúmania, ktoré umožňujú presnejšiu klasifikáciu prítomného fenoménu alebo dodatočne potvrdzujú pozitívne výsledky testu. Indikácie pre Coombsov test zahŕňajú krvné skupiny, krvné transfúzie, starostlivosť o matku alebo podozrenie na nekompatibilitu Rh.